LA TECHNOLOGIE

Comment fonctionne un test de flux latéral

Les tests immunochromatographiques rapides (également connus sous le nom de tests à flux latéral) ont été initialement développés à la fin des années 1980 comme un moyen simple et rapide de tester la grossesse. Depuis lors, cette méthode, qui ne nécessite ni personnel spécialisé ni équipement de laboratoire spécial, a été largement acceptée pour une variété d'applications au point de service et sur le terrain dans les diagnostics humains, vétérinaires et grand public. Les principaux composants d'un dosage à flux latéral et les formats de dosage utilisés sont décrits ci-dessous.

L'image ci-dessus montre la conception typique d'un dosage à flux latéral. Il se compose d'un tampon d'échantillon et de conjugué, d'une membrane de nitrocellulose et d'un tampon absorbant. Les composants individuels de la bandelette de test se chevauchent et sont fixés sur un support en plastique.

L'échantillon est d'abord appliqué sur le tampon d'échantillon, où il est modifié pour le rendre compatible avec les autres composants du test.

Des séparateurs de sang total spéciaux peuvent être incorporés dans le tampon d'échantillon pour s'assurer que seul le sérum atteint le deuxième composant du test, le tampon de conjugué, où un conjugué particulaire a été immobilisé. Ce dernier est généralement constitué de particules d'or, mais le latex est aussi souvent utilisé. Les particules sont liées au premier composant biologique du test (un anticorps ou un antigène), et lorsque l'échantillon migre vers le tampon de conjugué, il réhydrate le conjugué, permettant ainsi à une réaction de se produire entre l'analyte et le composant biologique lié au les particules d'or. Ce complexe migre ensuite vers le troisième composant du test, la matrice de réaction. La matrice de réaction consiste généralement en une membrane de nitrocellulose sur laquelle les autres composants biologiques spécifiques du dosage ont été appliqués.

La ligne de test est généralement constituée de protéines (antigènes ou anticorps) qui capturent le complexe primaire analyte-anticorps et génèrent un signal de couleur. Les particules conjuguées qui ne se sont pas liées à la ligne de test se lient à la ligne de contrôle, où dans la plupart des cas une immunoglobuline spécifique à l'espèce, qui réagit spécifiquement avec l'anticorps conjugué à l'or colloïdal, est immobilisée.

Ainsi, un signal de couleur est généré sur la ligne de contrôle indépendamment du résultat sur la ligne de test. Le quatrième composant du test de flux latéral est le tampon à effet de mèche. Il adsorbe le fluide de la membrane de nitrocellulose et agit comme le moteur de l'ensemble du dosage.

Les formats d'échantillons utilisés dans les dosages à flux latéral sont soit directs (dosage immunologique sandwich), soit compétitifs (dosage immunologique par inhibition) et permettent une analyse qualitative, semi-quantitative et, dans certains cas, quantitative de l'analyte.

Ces systèmes de test rapide direct sont utilisés pour détecter de grands analytes avec de multiples déterminants antigéniques, tels que le parvovirus qui peut être détecté à l'aide de notre kit de test Fassisi ParCo. Dans ce cas, un résultat positif est indiqué par l'apparition d'une ligne de test et d'une ligne de contrôle.

Le film suivant montre comment fonctionne un test immunologique en sandwich. Lorsqu'un analyte est présent dans l'échantillon, la ligne de test et la ligne de contrôle apparaissent dans le test.